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轉(zhuǎn)瞬,現(xiàn)已來到了七月中旬,在這個熱氣沖天的七月,用一個字描述它,是“熱”;用兩個字描述它,是“很熱”;用三個字描述它,是“十分熱”。在這個熱氣直逼的夏天,今天研域小編給大家總結(jié)下這個七月,客戶遇到的一些常見問題。
問題一:天氣這么熱,ELISA試劑盒開封后剩下試劑應(yīng)該如何保存?
答:針對已開封的試劑盒,剩下試劑仍需依照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,使用后的剩下試劑盒建議在實(shí)驗后1個月內(nèi)使用結(jié)束,產(chǎn)品過期時刻以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)所有組分都保證是安穩(wěn)的。
問題二:實(shí)驗成果不顯色或顯色值低什么原因?
答:
1.底物配制問題或底物已失效。
2.酶標(biāo)抗體中酶失活或效率低或漏加酶標(biāo)抗體。
3.抗原抗體不匹配。
4.稀釋度太高。
5.洗板次數(shù)過多,洗滌沖擊力太大等原因。
問題三:要驗證某個細(xì)胞上有無該蛋白的存在,需要做免疫組化和western blot實(shí)驗嗎?
答:免疫組化可以用來進(jìn)行定位,可是不能定量,并且有時會有假陽性,不易與布景區(qū)分;Western blot可以特異性檢測某個蛋白質(zhì)分子,進(jìn)行定量,可是不能定位。
問題四:抗原檢測出的分子量比資料上的大,是怎么回事?
答:
1.抗原形成了二聚體。增多巰基乙醇量,煮沸變性時刻延伸,可以翻開二聚體。
2.蛋白本身的潤飾如:糖基化,磷酸化等
問題五:為什么我的細(xì)胞提取液中沒有目標(biāo)蛋白?
答:
1. 你的細(xì)胞中不表達(dá)這種蛋白質(zhì),換一種細(xì)胞。
2.你的細(xì)胞中的蛋白質(zhì)被降解掉了,你必需加入PMSF,抑制蛋白酶活性。